高效菌的篩選及其在造紙廢水中應用的研究

　　引言
　　造紙廢水是一種高濃度難降解的有機廢水，排放量大，污染負荷高，成分復雜，毒性大，可生化性差(BOD與COD負荷比約為0.15～0.25)等特點，致使處理難度大[1]。
　　在曝氣生物濾池中存在著許多大小不同的微生物群落，主要由細菌組成，其數量約占污泥中微生物總量的90%左右，另外還有酵母、絲狀真菌、放線菌及微型藻類。在這些微生物群落中存在著多種優勢菌落，能降解和轉化污染物質，降低廢水的毒性和提高廢水的可生化性[2，3]。由于制漿廢液所含的污染物質十分復雜，難以期望采用某種生物處理就能把所有的污染物質去除，因此就需要將濾池中的這些優勢菌種篩選出來，研究其處理廢水的機理，使其更進一步地發揮降解和轉化污染物質的功能[4]。本實驗對曝氣生物濾池中分離出的菌株通過處理造紙廢水進一步優化出高效菌株，為處理造紙廢水提供參考。
　　1·實驗原料與方法
　　1.1實驗用水
　　實驗用水為某造紙廠廢水經過IC反應器處理后的水，其水質狀況如表1。
　　1.2降解菌篩選培養基
　　肉湯蛋白胨培養基[5，6]：牛肉膏4g，蛋白胨10g，NaCl 5g，瓊脂15g，用蒸餾水定容至1000mL。馬鈴薯培養基：馬鈴薯200g去皮，切塊煮沸20min，紗布過濾，取濾液加入葡萄糖20g和瓊脂20g，溶化后用蒸餾水定容至1000mL。
　　1.3實驗方法
　　1.3.1造紙廢水降解菌的分離、純化
　　曝氣池廢水在固體培養基上，采用稀釋平板法將廢水中的微生物分離、純化。根據菌落的培養特征，將真菌和細菌分開并編號。
　　1.3.2高效菌株的篩選
　　真菌培養（馬鈴薯培養基）
　　（1）高效真菌的初步篩選
　　將擴大培養后的真菌菌液離心，稱濕重0.20g菌體接種到含200mL廢水的三角瓶中，放入30℃，120r·min-1的搖床培養48h后，測CODcr值并按菌株對CODcr降解能力的大小排序。
　　（2）高效真菌對廢水CODcr降解的測定
　　將篩選出的對廢水CODcr降解能力最好的高效真菌菌株接種在12個含200 mL廢水的三角瓶中，放入30℃，120 r·min-1的搖床培養，編號1～12，每隔4h取一只三角瓶，離心，取上清液，測其CODcr。細菌培養（牛肉膏蛋白胨培養基）
　　（1）高效細菌的初步篩選
　　將擴大培養后的真菌菌液離心，稱濕重0.20 g菌體接種到含200 mL廢水的三角瓶中，放入37℃，120 r·min-1的搖床培養24h后，測CODcr值并按菌株對CODcr降解能力的大小排序。
　　（2）高效細菌對廢水CODcr降解的測定
　　將篩選出的對廢水CODcr降解能力最好的高效細菌菌株接種在12個含200 mL廢水的三角瓶中，放入37℃，120 r·min-1的搖床培養，編號13～24，每隔4h取一只三角瓶，離心，取上清液，測其CODcr。
　　2·實驗結果與討論
　　2.1真菌和細菌平板分離結果
　　在培養箱里培養48 h后，根據真菌和細菌的培養條件和生長特征（包括菌落的顏色、形狀、氣味、表面是否有突起等）得到表2、3的真菌和細菌菌落。